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            影響ELISA試劑盒實驗的因素有哪些?

            發布時間: 2022-07-20  點擊次數: 40次
               ELISA試劑盒適用于體外定性檢測人血清或血漿中的抗人類戊型肝炎(HEV)病毒IgM抗體ELISA檢測,自從60-70年代問世以來,得到科研工作者的認可及推崇,在歐美及中國獲得很大的推廣,尤其是國內生化領域的長足發展。ELISA試劑盒具有靈敏度高、特異性強、重復性好的特點,并具有操作簡潔、無放射性危害的優點,因此多年來廣泛應用于各高校、學院和科研機構的試驗室中。通過幾年的試驗調查,得出結論影響ELISA試驗的要素有如下三方面:
              一、試劑盒
              1、抗原、抗體活性對效價的影響:主要是試劑中抗體(或抗原)的效價下降或失活,成果不易判別。再有ELISA試劑盒靈敏度高,對雜質的反響靈敏度也高,試驗中空白對照OD值偏高或假陽性;
              2、酶結合物濃度過高,也會導致OD值假性增高。
              二、試驗儀器
              1、加樣器是否通過校正,酶免測定血清用血量很少,如手工加樣器的功能不好,吸取樣品不,會使成果忽高忽低;
              2、每次洗板前,應查看洗板機針孔有無阻塞。
              三、ELISA試劑盒操作
              1、檢測前先將試劑盒從冰箱取出置室溫平衡20min后運用,試劑用完及時放回冰箱冷藏,避免形成試驗成果假性下降;
              2、加樣時留意勿觸及包被板底部,避免擦傷包被物使抗體(抗原)掉落而影響試驗成果的精確性;
              3、洗刷不充分,會使成果假性增高,過分洗刷呈假陰性;
              4、比色時應保持包被孔底部無異物、無水汽,特別是冬天板從37℃水浴箱取出時,底部留有水汽,應將板底擦干后進行比色,水汽或孔內氣泡也會使OD值升高;
              5、抗原與抗體反響達到完全平衡,依賴于溫度與時刻。溫度高于45℃易引起失活及符號物掉落,溫度低于4℃,影響反響速度。
              由于ELISA試劑盒試驗的影響要素較多,我們在實踐工作中必須操作規范、仔細,避免和排除各種要素的影響,使之得到精確可靠的查驗成果。
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